Detección de ADN de Trypanosoma cruzi en heces secas de triatoma infestans: PCR vs Xenodiagnostico en un apoblación de niños infectados
Año de publicación: 1997
En la enfermedad de Chagas, la detección del agente T. cruzi en sangre circulante se considera fundamental para el diagnòstico en infecciones recientes (etapa aguda) como ser: transmisión congénita, accidentes de laboratorio, transfución sanguínea y en aquellos casos de sospecha de picadura del insecto vector. En la etapa crónica de la enfermedad (cuyo inicio no es fácil de definir), el diagnóstico se basa en técnicas serológicas y la detección de parasitos en sangre puede considerarse como un criterio válido para iniciar el tratamiento antichagásico en individuos jóvenes. La sensibilidad de las técnicas convencionales parasitológicas en la etapa crónica de la enfermermedad de Chagas es muy baja considerandose como mejor método al xenodiagnóstico con una sensibilidad del 30-50 por ciento . Actualmente la técnica de amplificación de ADN, reacción en cadena de la polimerasa (PCR) aplicada a muestras de sangre de individuos infectados con T.cruzi en forma crónica, ha demostrado una sensibilidad de 80 por ciento. No hemos propuesto verificar si el PCR combinado con una amplificación biológica como el Xenodiagnóstico, aumenta la sensibilidad de la detección de paràsitos circulantes en sangre. Con este objetivo se sometió a xenodiagnóstico a 22 niños seropositivos para T. cruzi y 3 seronegaticos. Los T. infestans empleados en el xenodiagnóstico, se colocaron en frascos individuales y se analizaron las heces depositadas en papeles de filtro, correspondiente a los primeros 8 días. Se analizaron por PCR, i) las muestras de sangre de estos niños y, ii) las heces secas de T. infestans depositadas en papel de filtro. De los 22 niños seropisitivos, 3 (13.6 por ciento) tuvieron parasitemia directa positiva, y 17(&& por ciento) fueron niños positivos por la técnica PCR en sangre. Se obtuvieron resultados de xenodiagnostico en solo 19 niños seropositivos cuyas vinchucas sobrevivieron los 45 días necesarios para el xenodiagnóstico; encontrandose que 11 de las 19 muestras (58 por ciento) fueron positivas. Sin embargo, al aplicar el PCR a las heces secas se detecto ADN de T. cruzi en 16 de las 19 muestras aumentando el numero de muestras positivas a un 84 por ciento.