El acoplamiento de las enzimas colesterol esterasa, colesterol oxidasa y peroxidasa es uno delos métodos mas empleados para la determinación de colesterol. La formulación de Allain y col.y la modificación de Roeschlau ha sido adaptada por Laboratorios Heiga en su reactivo Ref 450-L para la determinación en suero; planteando la necesidad de determinar su confiabilidad. Así,el objetivo de este trabajo es evaluar la exactitud y precisión del mismo. Para ello, seefectuaron 30 determinaciones consecutivas del analito en ensayos controles de dos niveles deconcentración (CN: 193 mg/dL y CA: 247 mg/dL) y 30 ensayos de adición (R: agregando 200mg de colesterol al CN). La precisión intralaboratorio se determinó mediante los coeficientes devariación (CV) y la precisión interlaboratorio con la Desviación Estándar Obtenida (DEO). Laexactitud se evaluó con el porcentaje de recuperación (porcentaje R) y el Desvío Relativo Porcentual(DRP) de la media obtenida con respecto al valor del CN (determinado por un Laboratorio deReferencia). Los CV oscilaron entre 0,63 por ciento y 1,13 por ciento y las DEO entre -1,70 y -0,18;considerándose ambos satisfactorias (CV menores a 5 por ciento DEO entre – 2 y + 2). El porcentaje R fue de 104,8 por ciento y el DRP del CN de 0,89 por ciento, considerándose aceptables por encontrarse entre 95 y 105 por ciento y menor a 9 por ciento, respectivamente. Se concluye que el método evaluado presenta precisiónintralaboratorio e interlaboratorio así como exactitud para niveles normales y altos decolesterol.