Una propuesta rápida y económica para detectar el virus de papiloma humano por PCR a partir de muestras cervicales con reactivo desnaturalizante
A rapid and economic option for human papillomavirus detection by PCR in cervical samples with denaturing reagent
Mem. Inst. Invest. Cienc. Salud (Impr.); 12 (1), 2014
Año de publicación: 2014
Trabajos han demostrado la utilidad de la captura híbrida II (CH II®) en la detección del virus de papiloma humano de alto riesgo oncogénico (HR-HPV) como método de tamizaje primario para detección de cáncer de cuello uterino, así como las bondades de la PCR que permite acceder a métodos de tipificación viral. Por ello el objetivo fue detectar el genoma del HPV por PCR a partir de muestras de CH II® cien veces diluidas. Estudio transversal en 141 muestras cervicales de mujeres con citología normal y anormal que concurrieron al IICS, UNA. Las muestras fueron procesadas por CH II® y almacenadas con reactivo desnaturalizante a -80ºC. Luego, las muestras fueron diluidas 100 veces con agua destilada y posteriormente procesadas por PCR. Se detectó HPV en 51% y 43% de las muestras analizadas por CH II® y PCR, respectivamente. Diecisiete de 23 muestras positivas por CH II® con carga viral relativa baja fueron negativas por PCR. Esto podría deberse a la degradación del material. Además, 6 muestras negativas por CH II® fueron positivas por PCR sugiriendo presencia de infección con tipos virales no incluidos en CH II® . Estos resultados sugieren que es posible realizar la detección de HPV por PCR en muestras procesadas por CH II® previa dilución. Esta propuesta rápida, sencilla y económica, minimiza el riesgo de perder el material genético en la extracción y permite acceder a métodos de tipificación viral que podrían contribuir con datos sobre tipos de HPV circulantes para realizar una vigilancia en la era post-vacunal.
Studies havedemonstrated the usefulness of the hybrid capture II (CHII) in thedetection of oncogenic high risk human papillomavirus (HR-HPV) asaprimaryscreeningmethod for detection of cervical cancer, as well as the benefits of PCR that allows accessto viral typing methods. The objective was todetect HPV by PCR from cervical samplesprocessed by CH II.It was a cross-sectional study including141cervicalsamples ofwomenattendingtheIICS,UNA. Thesampleswereprocessed by CH IIand storedwithdenaturing reagent at-80ºC.Then,theywere diluted 100 times with distilled water andsubsequently processed by PCR. HPV was detected in 51% and 43% of the samples analyzed by CH IIand PCR respectively. Seventeen of 23 positive samples by CH IIwith relatively low viral load were negative by PCR. This could be due to degradation ofthe material. In addition,sixnegative samples by CH IIwere positive by PCR suggestingthe presence of infection with HPV types not included in CH II. These results suggestthat it is possible to detect HPV by PCRfrom samples processed by CH IIprior dilution.This is a quick, easy and economic alternative which minimizes the risk of losing thegenetic material in the extraction process,and allows access to viral typing methods thatcouldprovide data aboutcirculating HPVtypesto carry out surveillance in thepost-vaccine era.